固相微萃取探針原位拉曼光譜用于不飽和脂質的分析

加拿大滑鐵盧大學JanuszPawliszyn等在AnalyticalChemistry上面發表了題為“ProfilingofUnsaturatedLipidsbyRamanSpectroscopyDirectlyonSolid-PhaseMicroextractionProbes”文章。在這項工作中，作者提出了拉曼光譜檢測和固相微提取（SPME）探針技術直接結合，原位檢測不飽和脂質。

脂質分離技術和質譜分析技術的發展促進了脂質分析.脂質組學研究。但色譜.質譜分析通常需要昂貴的儀器和耗材，并需要高質量的分析師來操作。光譜學檢測很便宜.快捷易操作，吸收光譜.熒光光譜等常用于生物樣本分析。然而，使用這些光譜分析脂質通常需要衍生分析來引入生色團或熒光團，巨大的衍生基團可能會扭曲分析結果。拉曼光譜不需要衍生，利用分子本身的振動吸收進行分析。但拉曼光譜靈敏度較低，因此需要對樣品進行預處理，對物體進行分離.富集。固相微萃取（SPME）該技術可以同時發揮分離富集的作用，種樣品分析(如食品).環境樣品等。因此將SPME探針與拉曼光譜的結合可以分析多種樣品基質中的多種物質。在這項工作中，作者用包埋聚丙烯腈（PAN）的.C18微粒包被的SPME探針提取脂質，然后用拉曼光譜進行原位分析，實現SPME探針上的脂質原位拉曼光譜分析。

作者首先選擇SPME包裝材料用于魚肝油DHA和EPA分析優化提取過程。C18.C8/SCX混合型與HLB三種SPME包被材料中，HLB1608/1630和1600/16100cm-一種特征吸收，與不飽和脂肪酸的特征吸收重疊，所以作者選擇了C18-PAN包被的SPME探針。在優化清洗溶劑時，作者發現使用水基溶劑清洗（如水甲醇或水丙酮）對脂質的影響較小，而異辛烷的影響較大，因此使用水基溶劑進行清洗。作者發現提取溫度對提取效率影響不大，但溫度較高RSD因此，z終選擇25℃提取過程15分鐘即可達到平衡，因此提取時間為15分鐘。

SPME探針上吸附的不飽和脂肪酸呈1445cm-1處的CH2伸縮振動.1265cm-1處的C-H面內伸縮振動.1655cm-1處的C=C以脂肪酸酯形式存在時，會有1720-1750cm-1峰。作者發現165555。cm-1處吸收不與其他吸收峰重疊，因此適合定量分析；165555cm-1與1445cm-光譜強度的比值可用于確定脂質的不飽和度，其線性程度較好（R2=0.952）。

作為驗證實例，作者用這種分析方法分析了不同種類的植物油，并添加了植物油Omega-3或Omega-6脂肪酸膳食補充劑。分析結果表明，樣品的成分比較復雜。盡管作者認為，盡管如此，SPME已廣泛應用于定量質譜分析，但拉曼光譜的定量方法仍需研究。

綜上所述，作者提出了一個SPME探針與拉曼光譜直接結合，以低成本分析各種基質中不飽和脂質的方法，提供了與拉曼光譜相比的方法LC-MS/MS試樣損傷z小的一種.快速原位分析甚至活體分析的替代方法。